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細胞破碎的技術方法

[2013/9/9]

  細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。

  由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類細胞結成的網狀結構不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現遞增態勢。動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產物的目的。

  化學試劑法

  • 方法:某些有機溶劑(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內含物有選擇地滲透出來。SDS(十二烷基磺酸鈉)是典型的陰離子表面活性劑

  • 特點:提取核酸時,常用此法破碎細胞。

  • 存在的問題:

  a) 時間長,效率低;

  b) 化學試劑毒性較強,同時對產物也有毒害作用